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将小块茎发芽得到的无菌苗接种到表2处理组合的培养基中,培养1周左右无菌苗上端死亡,而在基部开始膨大,培养2周时形成愈伤组织(见图1),培养百利宫3周时愈伤组织分化成苗(见图2),培养4周时对其进行观察和相关数据统计。从表2可见,1~6号培养百利宫基中组培苗没有增殖,而7~16号培养基均有一定程度的分化增殖,但是差别相对较大。从分化出的苗的高度以及增殖系数来看11号培养基最佳,增殖系数达到6.5,平均苗高达2.5 cm。其他培养基的增殖系数分布在1.2~4.0之间,平均芽苗高分布在1.2~2.0之间。从而筛选出最适继代增殖培养基为: MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。继代分化增殖情况见图3。表2  植物百利宫激素配比对旱半夏继代增殖培养的影响(略)
    选择继代培养后生长健壮并且有一定高度的试管苗,将其分百利宫成单株,分别接种到生根培养基上培养,10 d后观察并统计结果。见表3。表3  不同生长素浓度对旱半夏生根的影响。
    从表3可见,NAA的浓度以0.1 mg/L时为最佳浓度,可长出4~5条根,生根率达到100%,从而筛选出最适生根培养基为:1/2MS+NAA0.1 mg/L,并且在此培养基上生长的组培苗根部无愈伤组织形成,有利于下一步移栽的成活。
    选择生根良好的试管苗进行移栽,移栽前,先将试管苗从培养室中移至气温较低的室内百利宫进行练苗2~3 d,而后再在室内开瓶练苗2~3 d,最后,在瓶内加少许自来水练苗1~2 d后将其移栽至经高压灭菌的栽培土中,栽苗后需浇透水,初期加盖覆盖物,保温保湿,管理期间,土壤切忌太湿和应注意保持空气湿度。当确定苗已经成活并且长势良好时,再将覆盖物去掉暴露在空气中生长。
    旱半夏分化增殖最适培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,增殖系数达到6.5,平均苗高达2.5 cm;生根最适培养基为:1/2MS+NAA0.1 mg/L,生根率达到100%。
    在生根过程中选苗是很关键的,苗的高度不是主要因素,主要还是要看其健壮程度,细弱的苗生根移栽后是很难成活的。应选择健壮且有一定高度的组培苗来进行生根培养
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